CAS9質(zhì)粒系列
CRISPR/Cas基因組編輯工具系統(tǒng)涉及到sgRNA和Cas9兩種成分。在細(xì)胞內(nèi),Cas9蛋白在單一的向?qū)NA(sgRNA)引導(dǎo)下識(shí)別并切割基因組上的目標(biāo)靶位點(diǎn),從而在基因組上人為定向制造出雙鏈斷裂(DSB)。DSB一旦形成,會(huì)激發(fā)細(xì)胞內(nèi)源性的DNA損傷修復(fù)機(jī)制以修復(fù)DSB。細(xì)胞內(nèi)的DNA修復(fù)包括非同源末端連接修復(fù)(NHEJ)、微同源介導(dǎo)的末端連接修復(fù)(MMEJ)和同源重組修復(fù)(HR)等三種主要形式。前兩種修復(fù)均為易錯(cuò)修復(fù),修復(fù)的結(jié)果是在DSB附近形成插入/缺失突變。如果插入/缺失突變是個(gè)移碼突變且發(fā)生在關(guān)鍵功能結(jié)構(gòu)域?qū)?yīng)的外顯子上,則可能使目標(biāo)基因因移碼而不能編碼出有活性的蛋白,從而成為一種無效等位基因,結(jié)果導(dǎo)致基因敲除;如果同時(shí)向細(xì)胞內(nèi)提供同源供體,則這些供體會(huì)有機(jī)會(huì)被當(dāng)作用于DSB修復(fù)的同源供體,結(jié)果細(xì)胞通過HR修復(fù),成功實(shí)現(xiàn)在指定位置的基因敲入。
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品特征(備注)
貨號(hào)
詢價(jià)
CMV啟動(dòng)子/人源化Cas9(D10A)(Cas9缺刻酶);非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/黃色熒光報(bào)告基因(eYFP);人U6啟動(dòng)子/sgRNA。空載(可無限擴(kuò)繁)。
P-208Y
CMV啟動(dòng)子/人源化Cas9(D10A)(Cas9缺刻酶);非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/紅色熒光報(bào)告基因(mCherry);人U6啟動(dòng)子/sgRNA??蛰d(可無限擴(kuò)繁)。
P-208R
CMV啟動(dòng)子/人源化Cas9(D10A)(Cas9缺刻酶);非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/綠色熒光報(bào)告基因(eGFP);人U6啟動(dòng)子/sgRNA。空載(可無限擴(kuò)繁)。
P-208G
CMV啟動(dòng)子/人源化dCas9-VP64;非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/Puromycin;人U6啟動(dòng)子/sgRNA??蛰d(可無限擴(kuò)繁)
P-207P
CMV啟動(dòng)子/人源化dCas9-VP64;非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/紅色熒光報(bào)告基因(mCherry);人U6啟動(dòng)子/sgRNA??蛰d(可無限擴(kuò)繁)
P-207R
CMV啟動(dòng)子/人源化dCas9-VP64;非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/綠色熒光報(bào)告基因(eGFP);人U6啟動(dòng)子/sgRNA。空載(可無限擴(kuò)繁)
P-207G
CMV啟動(dòng)子/人源化dCas9-KRAB;非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/Puromycin;人U6啟動(dòng)子/sgRNA。空載(可無限擴(kuò)繁)
P-206P
CMV啟動(dòng)子/人源化dCas9-KRAB;非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/紅色熒光報(bào)告基因(mCherry);人U6啟動(dòng)子/sgRNA。空載(可無限擴(kuò)繁)
P-206R
CMV啟動(dòng)子/人源化dCas9-KRAB;非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/綠色熒光報(bào)告基因(eGFP);人U6啟動(dòng)子/sgRNA??蛰d(可無限擴(kuò)繁)
P-206G
CMV啟動(dòng)子/人源化dCas9-Eve;非洲爪蛙EF1a啟動(dòng)子/Puromycin;人U6啟動(dòng)子/sgRNA??蛰d(可無限擴(kuò)繁)
P-205P